磁性納米顆粒Fe_3O_4@SiO_2的制備及在全血DNA提取中的應(yīng)用

編號：CPJS05202

篇名：磁性納米顆粒Fe_3O_4@SiO_2的制備及在全血DNA提取中的應(yīng)用

作者：王念躍[1] ;馬超[2,3] ;李傳燕[2] ;王芳[2]

關(guān)鍵詞：磁性納米顆粒 制備 乙肝病毒 核酸提取 PCR擴增

機構(gòu)： [1]東南大學(xué)附屬第二醫(yī)院檢驗科,南京210003; [2]東南大學(xué)生物電子學(xué)國家重點實驗室,南京210096; [3]徐州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)信息學(xué)院,江蘇徐州221004

摘要： 目的自制Fe_3O_4@SiO_2磁性納米顆粒并評價在全血樣本中DNA提取效果,進一步研究開發(fā)磁珠法檢測HBV DNA的技術(shù)。方法采用溶劑熱法自制Fe_3O_4磁性納米顆粒,并用表面化學(xué)修飾法制備Fe3O4@SiO_2磁性復(fù)合顆粒;利用該顆粒經(jīng)吸附、洗滌、洗脫等步驟提取全血樣本中DNA,并通過電泳、PCR擴增等傳統(tǒng)技術(shù)檢測DNA提取效果,與煮沸法提取血清DNA樣本的效果進行對比。結(jié)果成功制備出直徑約550 nm的Fe_3O_4@SiO_2磁性納米顆粒,該顆粒分散均勻;自制的磁性納米顆�？捎糜谌�血DNA提取與純化,實驗操作簡便。自制磁性納米顆粒提取全血DNA濃度為150.56 ng/μL,純度為1.53;該提取方法與傳統(tǒng)煮沸裂解法對96份樣本進行對照研究,證實其靈敏度有較大提高。結(jié)論利用自制的Fe_3O_4@SiO_2磁性納米顆粒和合適的緩沖液體系,可成功地提取純度較高的DNA,通過PCR擴增及對比實驗表明,該磁性納米顆粒及其提取工藝經(jīng)優(yōu)化后,可用于傳染病的體外分子診斷研究。