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            【瑞士步琦】【應(yīng)用】SFC分離木犀草素的應(yīng)用

            【瑞士步琦】【應(yīng)用】SFC分離木犀草素的應(yīng)用
            步琦  2024-08-01  |  閱讀:473

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            瑞士步琦

            SFC 分離木犀草素

            SFC應(yīng)用



            1



            簡介

            紫蘇(Perilla frutescens)是一種草本植物,其葉和種子中含有多種生物活性成分,包括木犀草素(Luteolin),這是一種具有多種藥理作用的黃酮類化合物。木犀草素具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤等生物活性。


             Luteolin


            采用傳統(tǒng)的 Prep HPLC 方式雖然可以將木犀草素從紫蘇提取物中進(jìn)行分離,但是制備時(shí)間較長且流動(dòng)相損耗量較高,無論從時(shí)效性還是經(jīng)濟(jì)效益角度出發(fā),都不是最佳的選擇。


            2



            常規(guī)制備色譜洗脫條件

            • C18, 10x250mm, 15um

            • 梯度洗脫, 水/乙醇 +1% 甲酸

            • 進(jìn)樣量:0.5mL

            • 流速:15mL/min


             木犀草素色譜峰在 36min 之后


            除了洗脫時(shí)間較長之外,由于流動(dòng)相中水的存在,也給后續(xù)木犀草素樣品的濃縮帶來一定的麻煩。(即使步琦的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀能夠解決這一問題)。


            3



            采用 SFC 樣品純化

            那么是否可以采用超臨界流體色譜(SFC)的方式進(jìn)行樣品的純化呢?


            首先我們采用 Sepmatix SFC 8X 平行液相色譜快速篩選適合于木犀草素分離的色譜柱。


            實(shí)驗(yàn)條件:

            • 流速:3mL/min

            • 運(yùn)行時(shí)間:15min

            • 梯度洗脫 10-60% 甲醇


             紫蘇提取物在 PEI 色譜柱上具有更好的分離效果


            之后采用 Prep SFC-50 對(duì)樣品進(jìn)行大量分離與制備。


            實(shí)驗(yàn)條件:

            • PEI, 10x250mm, 5um

            • 梯度洗脫 20-40% 甲醇 5min

            • 進(jìn)樣量:0.3mL

            • 流速:20mL/min


             木犀草素色譜峰在 2min 之后


            兩種不同分離方式對(duì)比:

            萃取條件

            Prep HPLC

            Prep SFC

            木犀草素色譜峰

            36min 之后

            2min 之后

            總運(yùn)行時(shí)長

            42 min + 15 min平衡

            8 min + 1 min 平衡

            總?cè)軇┦褂?/p>

            390ml ethanol + 240ml water

            50 ml methanol


            4



            實(shí)驗(yàn)結(jié)論

            通過對(duì)比發(fā)現(xiàn),SFC 在分離木犀草素的過程中,無論從時(shí)效性還是溶劑消耗量上都優(yōu)勢明顯。




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