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寶藏姜黃——看看步琦如何來挖寶!
姜黃也被稱為郁金,是有很多功效的植物。姜黃能活血行氣,具有降血脂,抗腫瘤等作用。姜黃中主要的成分姜黃素是一種天然化合物,姜黃素是從姜科、天南星科中的一些植物的根莖中提取的一種二酮類化合物。其中,姜黃中約含姜黃素 3%~6%,姜黃素為橙黃色結(jié)晶粉末,味稍苦,不溶于水,在食品生產(chǎn)中也能用于腸類制品、罐頭、醬鹵制品等產(chǎn)品的著色。姜黃素具有降血脂、抗腫瘤、抗炎、利膽、抗氧化等作用,另外,也有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)姜黃素有助治療耐藥結(jié)核病。在本文中利用全頻固液萃取儀 E-800 熱萃取法提取的,采用紫外/可見分光光度法測定姜黃素總含量。
1
儀器
BUCHI 全頻固液萃取儀 E-800
分析天平(精度 ± 0.1 mg)
紫外/可見分光光度計
BUCHI 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 R-100
2
試劑與樣品
95%乙醇
合成姜黃素
為了安全處理,請遵循相應(yīng)MSDS!
示例:有機姜黃素粉,標(biāo)記姜黃素含量:3.7%,樣品是粉末,因此不需要額外的均質(zhì)。
3
姜黃素含量的測定包括以下步驟
標(biāo)準溶液的制備
姜黃粉直接提取
紫外/可見分光光度法測定姜黃素含量
3.1 標(biāo)準溶液的制備
將 25mg 姜黃素倒入 100mL 的量瓶中,溶解并稀釋至乙醇。注意準確的重量!
將 0.5 mL, 1 mL 和 2mL 原液轉(zhuǎn)移到三個不同的 100mL 容量燒瓶中,用乙醇定量。對于0.5 mL、1 mL和2 mL轉(zhuǎn)移的原液,這些標(biāo)準溶液分別含有 1.25、2.5 和 5 mg/L 的姜黃素(根據(jù)確切重量而定)。
將萃取紙濾筒放入萃取腔支架中。
稱 0.1 克均勻樣品到萃取紙濾筒中。注意準確的重量。
用棉絮覆蓋在萃取紙濾筒內(nèi)的樣品。
將含有樣品的纖維素頂針放入提取室,并將液位傳感器調(diào)整到樣品的高度。
將溶劑倒入燒杯中,放在相應(yīng)的加熱板上。
關(guān)閉防護罩,降下萃取架,激活萃取位置,打開冷卻水水龍頭或接通連接的冷水機。
根據(jù)表 1 中列出的參數(shù)啟動熱提取。
表1:全頻固液萃取儀 E-800 熱萃取參數(shù)
步驟 | 加熱等級 | |
萃取方法 | 熱萃取 | |
溶劑 | 乙醇 | 上萃取腔 9 下加熱 18 |
萃取 | 2.5h/3h | 熱萃取 |
淋洗 | 10min | 18 |
干燥 | AP | 11 |
溶劑體積(mL) | 120 |
提取液轉(zhuǎn)移到 100mL 容量瓶中。燒杯中的殘留成分用額外的乙醇沖洗,然后定容到 100 毫升。
注意:回收的溶劑應(yīng)單獨收集。再次使用前,通過測定吸光度來檢查溶劑中姜黃素的雜質(zhì),并將其與純?nèi)軇┻M行比較。如果有雜質(zhì),必須使用純?nèi)軇╅_始清洗方法(例如淋洗30分鐘)來清洗索氏腔?;厥盏娜軇┛梢酝ㄟ^蒸餾收集和純化,例如使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 R-100。
3.2 UV / Vis 分光光度法
樣品溶液:將 2.0mL 的提取溶液轉(zhuǎn)移到 25mL 的量瓶中,用乙醇定容。測定樣品溶液的吸光度,并與乙醇在 425nm處的吸光度進行了比較。
3.3 姜黃素的濃度與吸光度之間的關(guān)系可由以下方程得到
其中:
A:姜黃素類化合物在 425 nm 處的吸收率
an:標(biāo)準溶液 n 在 425 nm 處的吸光度
d:光路長度 (1 cm)
cn:標(biāo)準溶液濃度 n,單位為 mg/L
3.4 姜黃素百分含量按下式計算
其中:
% Curcuminoids:樣品中姜黃素含量的百分比
mSample:樣品重量 [g]
cs:樣品溶液的濃度為 mg/L
4
結(jié)果
用紫外/可見分光光度計對標(biāo)準溶液進行分析。用線性回歸法確定了濃度與吸光度的相關(guān)性,該方法僅適用于標(biāo)準溶液所涵蓋的范圍。
對于姜黃素的測定,姜黃樣品在 2.5h (150分鐘) 和 3 h(180分鐘) 提取時間內(nèi)進行三次分析。結(jié)果如表2所示。
表2:姜黃粉中姜黃素含量測定結(jié)果
姜黃素含量測定值為 3.7%,與標(biāo)記值吻合較好。當(dāng)提取時間從 2.5 小時增加到 3 小時時,姜黃素含量并沒有增加,說明 2.5 小時后提取完全。用全頻固液萃取儀 E-800 測定姜黃粉中姜黃素含量,結(jié)果可靠,重復(fù)性好。6 位可同時進行萃取,提高效率,每個位置獨立運行。
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