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            【超離應(yīng)用】快速密度梯度形成技術(shù),優(yōu)化病毒載體純化流程!

            【超離應(yīng)用】快速密度梯度形成技術(shù),優(yōu)化病毒載體純化流程!
            貝克曼庫爾特生命科學(xué)  2024-05-30  |  閱讀:3803

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            01

            技術(shù)背景


            隨著現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究的不斷深入,病毒載體作為一種強大的工具,在基因治療和基因編輯等領(lǐng)域發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。然而,病毒載體的純化過程往往耗時且復(fù)雜,這在一定程度上限制了相關(guān)研究的進(jìn)展。今天,我們就來探討一種全新的方法——利用VTi 90垂直轉(zhuǎn)子與CsCl(氯化銫)密度梯度離心技術(shù),來加速病毒載體的純化過程,提高實驗效率。



            02

            方法介紹


            研究團(tuán)隊通過使用VTi 90垂直轉(zhuǎn)子和Optima XPN超速離心機,結(jié)合CsCl密度梯度離心技術(shù),對病毒載體純化過程進(jìn)行了優(yōu)化。通過多段離心,調(diào)整離心速度和離心時間,實現(xiàn)了在更短時間內(nèi)達(dá)到密度梯度平衡的目標(biāo)。






            03

            實驗過程


            在實驗中,研究團(tuán)隊首先將病毒載體樣品與CsCl溶液混合,然后將其加入Quick-Seal熱封管中。再使用VTi 90轉(zhuǎn)子進(jìn)行離心,通過調(diào)整離心速度和離心時間,使樣品在離心管內(nèi)形成穩(wěn)定的密度梯度。離心結(jié)束后,通過分餾的方式收集不同密度的樣品組分,并使用折射儀測量各組分并繪制密度梯度曲線。通過比較不同實驗步驟的密度梯度曲線,找到與舊步驟密度梯度曲線相同的實驗條件,確保了樣品條帶位于相同位置。


            1.PNG


            離心結(jié)果示意圖:


            2.PNG


            04


             實驗結(jié)果


            基于 Optima XPN超速離心機對于分段離心步驟設(shè)置的支持(在一次運行中運行多個轉(zhuǎn)速步驟),研究團(tuán)隊最終找到了一種能夠在80分鐘(50+30分鐘)內(nèi)達(dá)到密度梯度平衡的優(yōu)化方案,較之前16小時的舊步驟提升了近12倍效率。


            3.PNG



            1. 以更高的速度開始分離可以幫助更快地形成密度梯度。

            2. 將運行速度降低足夠長的時間可以:

            • 與現(xiàn)有的(較慢的)步驟獲得相同的效果,將目標(biāo)條帶保留在完全相同的位置。

            • 平坦化密度梯度曲線,可提供更高的條帶分辨率。





            05

            結(jié)語


            加速密度梯度形成、優(yōu)化病毒載體純化效率是一項具有重要意義的研究工作,不僅為病毒載體純化領(lǐng)域帶來了新的突破,也為廣大科研工作者提供了更高效、更便捷的實驗方法,從而降低了實驗成本和時間成本,為相關(guān)領(lǐng)域的研究提供了有力支持!

            如果您對以上方案感興趣,不妨看看相關(guān)離心產(chǎn)品,以下組合搭配即助您輕松實現(xiàn)病毒載體純化流程:


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            Optima X系列智能型超速離心機


            Optima XPN系列配備益于初學(xué)者操作的 eXpert 智能軟件程序,同時為密度梯度離心等方法提供強大支持。產(chǎn)品還具有增強型數(shù)據(jù)管理功能,完美支持客戶 GMP 流程。

            主要型號:Optima XPN-100 / 90 / 80

            基礎(chǔ)型號:Optima XE-100 / 90

            最大轉(zhuǎn)速(rpm):100,000 / 90,000 / 80,000

            最大相對離心力(xg):802,000 / 694,000 / 548,300

            5.jpg


            Vti 90垂直轉(zhuǎn)子


            Vti 90垂直轉(zhuǎn)子,最大相對離心力可達(dá)到645,000xg,最大轉(zhuǎn)速下K因子低至6。分離沉降系數(shù)約為60s的空殼AAV顆粒,僅需80min,為分離病毒顆粒的理想選擇。

            • 最大RPM:90 ,000

            • 最大RCF:645,000 xg

            • K因子:6

            • 離心管數(shù)量/體積/大小/尺寸:

              ? 8 x 5.1mL

              ? ? x 2 in

              ? 13 x 51 mm

            • 轉(zhuǎn)頭容量:40.8mL



            6.PNG更多產(chǎn)品信息請咨詢:400-821-8935




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