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如何修煉成流式高手 - 樣本檢測

貝克曼庫爾特生命科學(xué) 2020-10-29 | 閱讀：2135

新建自動(dòng)補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)

問題來了，為什么調(diào)電壓就的重新補(bǔ)償？

熒光補(bǔ)償?shù)哪康木褪窍裏晒庖缏?duì)數(shù)據(jù)分析的復(fù)雜性，保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。從下面公式（以FITC溢漏到PE通道為例）可以看出，熒光溢漏（補(bǔ)償）的大小和平均熒光強(qiáng)度有直接關(guān)系，電壓gain值的大小又影響著MFI的大小。故電壓Gain的大小會(huì)直接影響熒光補(bǔ)償值的大小。

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Tips：補(bǔ)償調(diào)節(jié)時(shí)要注意：使用未染色的細(xì)胞做PMT的電壓設(shè)置；不要使用未染色的補(bǔ)償微球設(shè)置電壓

CytoFLEX 支持在線及脫機(jī)調(diào)補(bǔ)償。多色應(yīng)用中，增加新的單染管到先前保存的補(bǔ)償實(shí)驗(yàn)中，輕松實(shí)現(xiàn)全新補(bǔ)償矩陣的建立。并支持增益設(shè)置改變后，補(bǔ)償值自動(dòng)進(jìn)行修改，因此無需手動(dòng)調(diào)整補(bǔ)償。

在線根據(jù)增益轉(zhuǎn)換補(bǔ)償矩陣

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從補(bǔ)償庫導(dǎo)入補(bǔ)償值-工作流程：

從補(bǔ)償文件導(dǎo)入補(bǔ)償值：

檢測線性與補(bǔ)償

CytoFLEX平臺(tái)實(shí)測熒光強(qiáng)度與對(duì)應(yīng)檢測器增益設(shè)定值呈線性關(guān)系。調(diào)整增益時(shí)，軟件自動(dòng)實(shí)時(shí)重新計(jì)算溢出值。半導(dǎo)體工藝可高度重現(xiàn)，因此CytoFLEX平臺(tái)的實(shí)測熒光強(qiáng)度與對(duì)應(yīng)檢測器的增益設(shè)置成線性關(guān)系。而基于PMT檢測的非線性意味著需要根據(jù)經(jīng)驗(yàn)來確定電壓。

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