氨基酸分子改性的SiO2雜化材料用于胰蛋白酶固定化

編號(hào)：CPJS01127

篇名：氨基酸分子改性的SiO2雜化材料用于胰蛋白酶固定化

作者：李曄； 張恒建； 廖明霞； 劉濤；

關(guān)鍵詞：二氧化硅雜化材料； 酶活力； 氨基酸； 胰蛋白酶；

機(jī)構(gòu)： 北京科技大學(xué)化學(xué)與生物工程學(xué)院化學(xué)系；

摘要： 為改善二氧化硅載體材料本身的生物相容性和疏水性,維持包埋生物分子的活性,對(duì)水解前驅(qū)體3-氨基丙基三甲氧基硅烷進(jìn)行了氨基酸分子改性.采用N-Fmoc-L-纈氨酸和氯化亞砜反應(yīng)生成N-Fmoc-L-纈氨酰氯,再與3-氨基丙基三甲氧基硅烷反應(yīng)生成N-(3-三甲氧基硅基)丙基-N’-Fmoc-L-纈氨酰胺.然后去除Fmoc,得到N-(3-三甲氧基硅基)丙基-L-纈氨酰胺.通過IR,MS和1H NMR等分析手段對(duì)合成化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征.以正硅酸甲酯(TMOS)和N-(3-三甲氧基硅基)丙基-L-纈氨酰胺為復(fù)合硅源,經(jīng)過溶膠-凝膠法包埋胰蛋白酶,當(dāng)N-(3-三甲氧基硅基)丙基-L-纈氨酰胺的摩爾分?jǐn)?shù)為15%時(shí),固定化胰蛋白酶活力的絕對(duì)值為199 U,游離酶的酶活力絕對(duì)值為103 U,而四甲氧基硅烷直接包埋的固定化酶活力的活性僅為38 U.由雜化硅源得到的固定化酶的活性是以四甲氧基硅烷為水解前驅(qū)體的固定化酶活性的5倍.雜化硅源固定化胰蛋白酶比游離酶的最高活力提高近2倍.結(jié)果表明,氨基酸分子經(jīng)水解前驅(qū)體修飾后,水解產(chǎn)生的固定化載體具有良好的生物相容性.通過改性載體制備的固定化酶對(duì)甲醇變性劑的穩(wěn)定性、酸堿的抵抗性及熱穩(wěn)定性均有明顯提高.