多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色技術(shù)檢測呼吸道病原體

編號：NMJS05755

篇名：多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色技術(shù)檢測呼吸道病原體

作者：樊歡 ;戚宇華 ;朱政 ;葛以躍 ;崔侖標 ;吳濤 ;史智揚

關(guān)鍵詞：呼吸道病原體 多重PCR 侵入反應(yīng) 納米金顯色

機構(gòu)： 江蘇省疾病預(yù)防控制中心病原微生物研究所衛(wèi)生部腸道病原微生物重點實驗室,南京210009

摘要： 目的 建立一種呼吸道病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色的檢測方法.方法 針對幾種重要的呼吸道病原體（甲型流感病毒、乙型流感病毒、SARS冠狀病毒、嗜肺軍團菌、腦膜炎奈瑟菌以及腺病毒）保守區(qū)基因設(shè)計引物,進行多重PCR反應(yīng)、核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色反應(yīng),對多種呼吸道病原體同時進行檢測,以人偏肺病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、肺炎鏈球菌4種呼吸道病原核酸評價其檢測特異性,以體外轉(zhuǎn)錄的病毒RNA或擴增的PCR片段評價其檢測敏感性.結(jié)果 成功建立了一種呼吸道病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色的檢測技術(shù).建立的檢測方法可特異的檢測目的病原體,且與人偏肺病毒、呼吸道合胞病毒、人鼻病毒、肺炎鏈球菌無交叉反應(yīng).該方法對不同靶標的檢測靈敏度介0.5 ～50拷貝/μL.結(jié)論 建立的呼吸道病原體多重PCR結(jié)合核酸侵入反應(yīng)及納米金顯色技術(shù)的檢測方法,具有較高的檢測特異性及靈敏度,檢測通量高,肉眼即可觀察結(jié)果,在傳染病病原體檢測方面具有廣闊的應(yīng)用前景.