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你知道如何使用 TLC 薄層數(shù)據(jù)對(duì) Flash 方法進(jìn)行優(yōu)化嗎？

步琦 2022-01-24 | 閱讀：1098

在嘗試使用 Flash 色譜對(duì)樣品進(jìn)行大量制備之前，化學(xué)家通常會(huì)運(yùn)用薄層色譜(TLC)點(diǎn)板分析并得到數(shù)據(jù)，這樣做的目的是為接下來的 Flash 樣品制備找到合適的方法參數(shù)，除此之外也可以節(jié)省大量的時(shí)間和溶劑。接下來“小步”同學(xué)會(huì)為大家介紹關(guān)于 TLC 的數(shù)據(jù)結(jié)果如何轉(zhuǎn)化為優(yōu)化分離的一些基本理論，以及在軟件當(dāng)中又是如何實(shí)現(xiàn)這一功能的。

首先，我們需要了解從 TLC 篩選獲得的數(shù)據(jù)與 Flash 小柱分離所需的柱體積 (CV) 之間的關(guān)系。典型的 TLC 點(diǎn)板示例如下所示。

圖：其中 (a) 代表溶劑前沿與原點(diǎn)的距離，

(b) 分析物與原點(diǎn)的距離。

運(yùn)行 TLC 分析后，有必要計(jì)算各個(gè)點(diǎn)的保留因子(R_f)。這可以通過一個(gè)簡(jiǎn)單的公式來完成：

R_f = 分析物與原點(diǎn)的距離（b）/

前沿與原點(diǎn)的距離（a）

其中：R_f=1 表示在 TLC 上沒有保留（隨著溶劑前沿向上移動(dòng)），R_f=0 表示對(duì)溶劑沒有親和力（停留在起始線）。

由于保留因子和柱體積之間存在以下關(guān)系，因此可將TLC 開發(fā)的方法轉(zhuǎn)移到 Flash 制備色譜當(dāng)中：

CV = 1/R_f

保留因子和柱體積之間的反比關(guān)系在實(shí)踐中可以如下所示：

圖：最佳 R_f 值范圍為 0.15-0.35，

換算為柱體積 CV 則為 2.8-6.7

較小的 R_f 值會(huì)導(dǎo)致很長(zhǎng)的運(yùn)行時(shí)間和高溶劑消耗，而較大的 R_f 值會(huì)導(dǎo)致運(yùn)行時(shí)間較短且存在不完全分離的風(fēng)險(xiǎn)，如下圖所示。

圖：不同 R_f 和 CV 值下的 TLC 結(jié)果和 Flash 色譜圖示例（a）較小的 CV 值會(huì)縮短運(yùn)行時(shí)間，從而導(dǎo)致分離不完全。(b) CV 范圍在 2.8 和 6.7 之間，可以在分離度和運(yùn)行時(shí)間以及溶劑消耗之間取得最佳平衡。(c) CV 值越大，運(yùn)行時(shí)間越長(zhǎng)，溶劑消耗量越大。

這些基本理論可以很容易地應(yīng)用于特定的方法開發(fā)軟件，例如 PURE 中壓系統(tǒng)上的 Navigator，該程序可以將 TLC 數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為優(yōu)化的 Flash 方法，以獲得最佳的分離和純化。

用戶只需幾個(gè)簡(jiǎn)單的步驟即可將 TLC 結(jié)果傳輸?shù)杰浖校⒋_定最適合其 Flash 快速純化過程的參數(shù)。