藥用輔料不溶性微粒檢測-關(guān)注輔料蔗糖不溶性微粒超標(biāo)的危害

近年來，疫苗引發(fā)的不良反應(yīng)受到社會關(guān)注，由此引發(fā)的疫苗用輔料的使用安全性也備受挑戰(zhàn)。輔料中可能引入的不溶性微粒是產(chǎn)生免疫應(yīng)答風(fēng)險因素之一。

藥用輔料蔗糖在生物技術(shù)藥物的凍干工藝中常用作保護劑，它既能在冷凍過程中充當(dāng)?shù)蜏乇Ｗo劑，又能在干燥脫水過程中起到脫水保護劑的作用，并且不含還原基不會使得生物制品發(fā)生蛋白質(zhì)褐變反應(yīng)從而變質(zhì)失活。在生物技術(shù)藥物的冷凍干燥配方中，蔗糖是最常用、用量最大的保護劑，因此在其質(zhì)量控制過程中安全性應(yīng)予以足夠的重視。

王玨等學(xué)者在《基于小鼠腘窩淋巴結(jié)模型對疫苗用輔料蔗糖中不溶性微粒激發(fā)免疫應(yīng)答風(fēng)險的評估》中對比了部分不同廠家蔗糖產(chǎn)品中不溶性微粒在大小和數(shù)量上的差異，實驗結(jié)果表明不同廠家的蔗糖產(chǎn)品顯示出對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖不同程度的影響，作用程度與產(chǎn)品中的不溶性微粒數(shù)目有關(guān)。

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表1為文章中提及的蔗糖中雜質(zhì)顆粒進行尺寸和數(shù)量的測定結(jié)果，結(jié)果表明該雜質(zhì)顆粒大小為100～300 nm; 不同廠家間不溶性微粒在大小和數(shù)量上均存在差異。

在圖6中給出了使用CCK8法測定不同廠家蔗糖對小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響，從圖中可以看出，不同廠家蔗糖及其協(xié)同ConA 的增殖強度存在較顯著的差異，Suc-4增殖作用最強。這種影響程度與蔗糖中不溶性微粒的個數(shù)呈正相關(guān)。由此可以推斷，蔗糖中不溶性微粒有造成機體免疫應(yīng)答風(fēng)險的可能，必須予以合理的控制。

那么如何進行藥物蔗糖輔料的不溶性微粒檢測，目前針對于不溶性微粒檢測在中國藥典2020版中提到了兩種方法，分別是光阻法和顯微計數(shù)法。

目前光阻法的設(shè)備應(yīng)用在藥物的不溶性微粒檢測領(lǐng)域比較廣泛，這歸因于其較深的歷史數(shù)據(jù)積累，顯微鏡法是歷史上最初采用的方法，但是由于操作較為復(fù)雜，并且隨著科技的發(fā)展，新的檢測技術(shù)的出現(xiàn)（光阻法）大大提高了檢測效率，顯微鏡法逐漸被人們淡忘。在當(dāng)前最新版的藥典規(guī)定中顯微鏡法仍然在列，這是因為有些特殊制劑使用光阻法設(shè)備進行不溶性微粒檢測時會產(chǎn)生明顯假性結(jié)果，此時應(yīng)該采用顯微鏡法。

1、 YH-LIPS系列光阻法不溶性微粒分析儀介紹

LEIP 系列不溶性微粒檢測分析儀滿足《中國藥典》要求，可直接檢測注射液、無菌粉、輸液器具及藥包材的不溶性微粒數(shù)量及大小。儀器采用高性能進口激光光源及補償電路，保證各種樣品的測試精準(zhǔn)度。進樣狹縫及管路采用進口316L 及進口PTFE 材料，可直接檢測有機溶劑、油基質(zhì)等特殊溶液。

2、 YH-MIP系列顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀介紹

YH-MIP系列顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀已解決傳統(tǒng)顯微鏡法測試數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性不足、操作繁瑣、對人眼傷害較大、檢測結(jié)果不可追溯等問題，大大提升了檢測精度跟效率，其中 YH-MIP-0205 Pro型顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀在YH-MIP 0103儀器已有的技術(shù)優(yōu)勢下，進行了全新優(yōu)化，能夠以全自動的方式實現(xiàn)樣品中的不溶性微粒檢測。