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細胞異質性存在于生命醫(yī)學研究的各個領域,包括腫瘤學,干細胞分化發(fā)育,免疫學等。重大生命醫(yī)學問題的解決,必須首先解決細胞異質性的問題。
通過單細胞檢測技術,對異質性細胞進行分類,是細胞異質性分析的主要手段。單細胞測序技術實在基因層面的單細胞分析,但是所有生物學效應,包括生理學效應,病理學效應,藥物反應等,*后都是通過特定蛋白質來發(fā)生和調控的。
Milo單細胞蛋白質表達定量分析系統(tǒng),技術來源自美國**大學加州大學伯克利分校Amy E. Herr教授實驗室,該實驗2014年原創(chuàng)性技術發(fā)表在Nature Method,題目Single cell western blot。ProteinSimple借助強大的軟件及硬件研發(fā)實力,將其開發(fā)為單細胞蛋白質表達定量檢測系統(tǒng),用于細胞異質性及稀缺細胞樣本(比如循環(huán)腫瘤細胞等)研究。
檢測流程
Milo單細胞蛋白質定量表達分析系統(tǒng),是**款單細胞水平,蛋白質表達定量分析系統(tǒng)。Milo系統(tǒng)采用**的微流控western blot芯片,通過單細胞微孔設計,采集單細胞,然后原位裂解細胞,釋放蛋白,進行蛋白質電泳,將不同分子量蛋白進行分離,提高免疫學檢測特異性。之后,采用**技術進行蛋白質原位捕獲,使用western blot驗證抗體及熒光標記二抗直接雜交,掃描儀進行芯片掃描后,Scout軟件對掃描結果進行深度定量分析。
因為Milo對單細胞蛋白質表達分析的獨特優(yōu)勢,在7月份上市之后,連續(xù)獲得了MIT technology review 年度創(chuàng)新獎,美國**雜志 The Scientist 年度創(chuàng)新產品**名。
Milo具有極其強大的功能:
1. 單張芯片可進行1000-2000個單細胞western blot檢測
2. 單個細胞可進行數(shù)十個靶蛋白檢測
3. 僅需使用western blot驗證抗體
4. 基于western blot技術,蛋白質分離后檢測,提高免疫學檢測特異性
5. 全程檢測4-6小時
6. 適用于:細胞異質性研究及稀缺樣本檢測。
參考文獻:
1.Microfluidic Western blotting,PNAS,December 26, 2012, vol. 109 ,no. 52,21450–21455
2. Single-Cell Western Blotting after Whole-Cell Imaging to Assess Cancer Chemotherapeutic
Response, Anal. Chem. 2014, 86, 10429?10436
3. Single-cell western blotting,Nature methods,11, 749–755 (2014) doi:10.1038/nmeth.2992 4. Hydrogel Pore-Size Modulation for Enhanced Single-Cell Western Blotting,Adv. Mater. 2016, 28,
327 –334
5. Single cell–resolution western blotting,1508 | VOL.11 NO.8 | 2016 | Nature protocols
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