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NEURAL ACTIVITY ASSAY
神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)功能實(shí)時(shí)檢測(cè)攻略
◆ ◆ ◆ ◆
PART I 原理介紹
為什么要檢測(cè)神經(jīng)電活動(dòng)?
研究證明構(gòu)建體外神經(jīng)元疾病模型是研究神經(jīng)元功能和神經(jīng)系統(tǒng)復(fù)雜疾病的一個(gè)有效策略。細(xì)胞成像、基因表達(dá)分析或者蛋白印跡這些方法能夠全面地反應(yīng)神經(jīng)疾病模型的復(fù)雜性嗎?神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)功能又是怎樣的?科學(xué)家們很難得到一個(gè)完整的答案。而使用Maestro MEA技術(shù),任何科學(xué)家都能夠快速簡(jiǎn)單地高通量檢測(cè)活細(xì)胞的網(wǎng)絡(luò)電活動(dòng)。
什么是高通量微電極陣列?
Axion的MEA板底部緊密嵌合了呈網(wǎng)格狀的電極陣列。科學(xué)家們可以在電極上貼附培養(yǎng)神經(jīng)元等可興奮性細(xì)胞,它們會(huì)逐漸成熟并形成網(wǎng)絡(luò),并*終生成網(wǎng)絡(luò)功能。這樣MEA板上每個(gè)電極就都可以捕捉到毫秒級(jí)的神經(jīng)元自發(fā)放電,為您在時(shí)間和空間兩個(gè)維度提供精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。您還可以通過電刺激或者光刺激進(jìn)一步拓展實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
適用樣本
原代神經(jīng)元細(xì)胞,iPSC衍生神經(jīng)元,腦片,iPSC衍生神經(jīng)球/類器官/迷你大腦
三個(gè)層面了解神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)功能
神經(jīng)細(xì)胞(橙色)經(jīng)培養(yǎng)覆蓋于固定在MEA板底部的電極(灰色)上。Maestro MEA系統(tǒng)檢測(cè)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的功能,包括電活動(dòng)、同步性和網(wǎng)絡(luò)震蕩。
Activity 電活動(dòng)
如何判斷神經(jīng)元有沒有功能?動(dòng)作電位是一個(gè)重要標(biāo)志。動(dòng)作電位發(fā)放頻率高表明其放電頻繁;發(fā)放頻率低意味著神經(jīng)元電生理功能可能已受損。
Synchrony 同步性
如何評(píng)判神經(jīng)元間突觸的功能?突觸的存在使得神經(jīng)元之間的聯(lián)系成為可能。一個(gè)神經(jīng)元的動(dòng)作電位藉此得以影響到另一個(gè)神經(jīng)元發(fā)放的可能性。同步性檢測(cè)能夠反映出突觸連接的強(qiáng)弱,及不同的神經(jīng)元在毫秒級(jí)別時(shí)間范圍內(nèi)產(chǎn)生同步放電的可能。
Oscillation 網(wǎng)絡(luò)震蕩
如何確定樣本的網(wǎng)絡(luò)功能?有功能的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)是由興奮性和抑制性神經(jīng)元共同構(gòu)成的。它的一個(gè)重要特征就是神經(jīng)震蕩,即不斷變化中的神經(jīng)活動(dòng)高潮-低谷周期。而一個(gè)MEA孔內(nèi)檢測(cè)到的所有神經(jīng)元電發(fā)放在時(shí)間軸上的規(guī)律就是該樣本的震蕩數(shù)據(jù)。
PART II Maestro系統(tǒng)介紹
Maestro MEA實(shí)驗(yàn)流程
Maestro使得MEA實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單到超乎想象。僅需三步:
A
將神經(jīng)元培養(yǎng)在Axion MEA板上。
B
將MEA板放入Maestro MEA系統(tǒng),靜待環(huán)境倉(cāng)達(dá)到溫度和氣體濃度的平衡。
C
使用AxIS Navigator軟件無創(chuàng)且實(shí)時(shí)地從三個(gè)層面(電活動(dòng)、突觸功能、網(wǎng)絡(luò)震蕩)定量分析神經(jīng)元電活動(dòng)。配套的其他分析軟件,還能自動(dòng)計(jì)算出多于25種類別的二級(jí)參數(shù),供您進(jìn)行數(shù)據(jù)深度挖掘。
Maestro平臺(tái)優(yōu)勢(shì)
提供關(guān)鍵答案
與常規(guī)方法間接檢測(cè)可興奮性不同,Maestro MEA系統(tǒng)的測(cè)試直接反映神經(jīng)元的動(dòng)作電位。比較常見的間接技術(shù)如鈣成像,無法捕獲微小卻重要的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)信號(hào)變化。而蛋白表達(dá)水平的檢測(cè)結(jié)果與細(xì)胞疾病模型功能的相關(guān)性也很差。只有使用Maestro MEA系統(tǒng)實(shí)時(shí)追蹤細(xì)胞的可興奮性,您才能回答這個(gè)關(guān)鍵問題:樣本是否在以您期待的方式放電?
無標(biāo)記分析
Maestro MEA系統(tǒng)無創(chuàng)地檢測(cè)神經(jīng)元群落的電信號(hào),杜絕使用染料或報(bào)告子,避免其對(duì)細(xì)胞模型的干擾,您數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性無需置疑。更使您得以實(shí)現(xiàn)對(duì)一個(gè)樣本電活動(dòng)的長(zhǎng)期(數(shù)小時(shí)、數(shù)周甚至數(shù)月)追蹤。
原位檢測(cè)
其它的高通量平臺(tái)(例如自動(dòng)化膜片鉗或者流式細(xì)胞儀)通常會(huì)要求對(duì)樣本做預(yù)處理,制備成單細(xì)胞懸液再上機(jī)檢測(cè)。對(duì)于可興奮性細(xì)胞這種以互相交聯(lián)的功能性網(wǎng)絡(luò)形式存在的樣本來說,這是一種非常不理想的狀態(tài)。此外,細(xì)胞收集的過程也需要大量的手動(dòng)操作步驟。只有Maestro MEA系統(tǒng)能夠在捕獲神經(jīng)元細(xì)胞可興奮性的同時(shí)維持其形態(tài)學(xué)上的復(fù)雜性。
簡(jiǎn)單易用
只有電生理專家才會(huì)使用Maestro MEA系統(tǒng)?不存在的!只要把細(xì)胞培養(yǎng)在MEA板上,然后把板放入Maestro MEA儀器檢測(cè)倉(cāng)內(nèi),即可記錄神經(jīng)元電生理數(shù)據(jù)。Axion提供的一系列軟件會(huì)幫您完成剩下的數(shù)據(jù)分析步驟,甚至連可直接用于文獻(xiàn)發(fā)表的圖表都搞定了。您也可以!
PART III 應(yīng)用方向簡(jiǎn)介
神經(jīng)疾病細(xì)胞模型,藥物神經(jīng)毒性篩選,神經(jīng)細(xì)胞功能檢測(cè),光遺傳學(xué),模式生物表型篩選,干細(xì)胞開發(fā)及質(zhì)控,神經(jīng)球、腦類器官研究
帕金森
脆性X綜合癥
高通量微電極陣列+光遺傳的強(qiáng)大組合
Axion公司創(chuàng)新的高通量光遺傳刺激系統(tǒng)Lumos,可對(duì)MEA板內(nèi)樣本進(jìn)行光強(qiáng)(1-100%)和光照時(shí)長(zhǎng)(低至100ms)的控制。您可以選擇多至四種不同波長(zhǎng)的LED光源來刺激單孔內(nèi)的細(xì)胞,并行處理通量高至96個(gè)。您也可以對(duì)每個(gè)孔內(nèi)混合培養(yǎng)細(xì)胞樣本中的某一類細(xì)胞群體進(jìn)行單獨(dú)控制,建立高階神經(jīng)疾病模型。所以,通過在軟、硬件上與Maestro系統(tǒng)無縫整合,Lumos可以助您精準(zhǔn)、靈活、高效地實(shí)現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)及實(shí)時(shí)的功能檢測(cè)。
Axion BioSystems
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