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儀器技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)

加壓毛細(xì)管電色譜（pCEC-Pressurized Capillary Electrochromatography System ）是近年發(fā)展起來(lái)的一種新型微分離分析技術(shù)，它整合了毛細(xì)管電泳與液相色譜的優(yōu)點(diǎn)。在雙重分離機(jī)制的作用下， pCEC對(duì)于被分離樣品細(xì)微之處的分辨能力得到了極大的提高，代表了分析學(xué)界高效微分離的趨勢(shì)。

與傳統(tǒng)高壓液相分析技術(shù)相比，毛細(xì)管電色譜更短的分析時(shí)間，更細(xì)的柱內(nèi)體積和更為快速的分離速度使其比之高壓液相分析儀消耗更少的溶劑量，并由此產(chǎn)生更少的廢液，大大節(jié)約了成本，保護(hù)了環(huán)境。

儀器生產(chǎn)公司背景

TriSepTM- 2100加壓毛細(xì)管電色譜是美國(guó)通微股份有限公司研發(fā)生產(chǎn)的國(guó)際首臺(tái)商業(yè)化加壓毛細(xì)管電色譜。

美國(guó)通微技術(shù)股份有限公司（Unimicro Technologies， Inc.）是國(guó)際**的專業(yè)微分離分析的儀器制造商，多年來(lái)一直致力于電色譜及多維微分析儀器的研發(fā)、制造及應(yīng)用推廣。

作為微分析技術(shù)的***，通微于1999年推出了世界上首臺(tái)專用的加壓毛細(xì)管電色譜儀TriSepTM-2000，2004年，美國(guó)通微再度推出第三代功能更強(qiáng)大的毛細(xì)管電色譜系統(tǒng)TriSepTM- 2100。

儀器簡(jiǎn)要介紹

該TriSepTM- 2100加壓毛細(xì)管電色譜系統(tǒng)是建立在擁有多項(xiàng)**技術(shù)的2010型基礎(chǔ)上，配以**生產(chǎn)的ElectroPakTM 系統(tǒng)毛細(xì)管色譜柱，采用1.5µm超細(xì)顆粒填料，柱效更高，峰形更好，峰容量更大。

實(shí)現(xiàn)了多種檢測(cè)模式。尤其與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)技術(shù)，為蛋白質(zhì)組學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、天然藥物等研究領(lǐng)域提供了創(chuàng)新的技術(shù)手段。

儀器原理

通過(guò)在填充有HPLC填料的毛細(xì)管電色譜柱兩端施加高壓直流電場(chǎng)，樣品在毛細(xì)管色譜柱中的保留行為同時(shí)受到電滲流及其在流動(dòng)相與固定相之間分配系數(shù)的影響，大大提高了樣品分離能力。

毛細(xì)管電色譜結(jié)合了毛細(xì)管電泳和高效液相色譜的動(dòng)力優(yōu)勢(shì)，不單純依靠壓力驅(qū)動(dòng)色譜柱內(nèi)流動(dòng)相的流動(dòng)，還通過(guò)在毛細(xì)管柱兩端加上電場(chǎng)所產(chǎn)生的電場(chǎng)力驅(qū)動(dòng)溶劑的流動(dòng)，大大降低了柱內(nèi)壓力。因此在用毛細(xì)管電色譜儀進(jìn)行分析時(shí)，我們可以使用內(nèi)徑細(xì)小的毛細(xì)管色譜柱，超小粒徑填料（1.5μm或3μm）而不用擔(dān)心高反壓，大大提高了理論塔板數(shù)和分離效果。

相對(duì)于液相色譜微升級(jí)進(jìn)樣量，毛細(xì)管電色譜的分析量只為納升級(jí)，在活體取樣時(shí)就體現(xiàn)出了其巨大優(yōu)勢(shì)。常規(guī)液相色譜無(wú)法分析納升級(jí)的樣品，過(guò)多的取樣量往往會(huì)致死本體。

應(yīng)用范圍

已經(jīng)在生命科學(xué)、中藥研究、藥物分析、環(huán)境保護(hù)、食品安全、化學(xué)化工等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用

尤其適用于復(fù)雜生物及化學(xué)體系的研究

儀器連用

結(jié)合毛細(xì)管柱上檢測(cè)技術(shù)，pCEC 可與紫外檢測(cè)器（UV ）、熒光檢測(cè)器（FLD）、激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器（LIF）、電化學(xué)檢測(cè)器（ECD）及質(zhì)譜（MS）等多種檢測(cè)手段聯(lián)用

儀器特點(diǎn)

• 超高效分離：25萬(wàn)以上理論塔板數(shù)/米

• 超快速分離：30秒鐘完成4種樣品的分離 　

• 超高峰容量：3倍于高效液相色譜的峰容量

• 超高精度分離：重現(xiàn)性與液相色譜媲美

儀器模塊介紹

• 穩(wěn)定的納升級(jí)二元溶劑梯度輸送系統(tǒng) pCEC將高壓泵運(yùn)用于CEC系統(tǒng)中，液體在液壓和電滲流的共同作用下通過(guò)毛細(xì)管色譜柱。該系統(tǒng)可穩(wěn)定輸送幾百納升級(jí)的流量，液壓和電壓可同時(shí)或獨(dú)立地施加于毛細(xì)管色譜柱的兩端，程序可調(diào)。

  加壓毛細(xì)管電色譜擁有幾項(xiàng)明顯的優(yōu)勢(shì)：(1)可有效地抑制分離體系中氣泡的產(chǎn)生；(2)由于采用了壓力流和閥進(jìn)樣等方法，可方便地實(shí)現(xiàn)二元溶劑梯度洗脫，提高了分析方法的靈活性、選擇性和分析速度；(3)采用閥進(jìn)樣保證了進(jìn)樣的定量和重復(fù)性；(4)壓力流和進(jìn)樣閥的存在，使該系統(tǒng)可與樣品處理相聯(lián)，實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)、在線樣品分析；(5)從進(jìn)樣到分離及多次連續(xù)操作的整個(gè)分析過(guò)程中，高壓電場(chǎng)不間斷，保證了系統(tǒng)的穩(wěn)定性和分析的重現(xiàn)性。

• 微流控制系統(tǒng)

  微流控制部分由分流閥、反壓閥、溶劑混合閥、定量進(jìn)樣閥和限流閥等部件組成。分離毛細(xì)管色譜柱端維持恒定的柱前壓是體系穩(wěn)定的關(guān)鍵，通過(guò)分流閥和反壓閥配合來(lái)實(shí)現(xiàn)。溶劑由高壓泵以恒流的形式泵出，在分流閥處轉(zhuǎn)為恒壓的形式驅(qū)動(dòng)，從而與高壓電場(chǎng)的電滲流匹配，實(shí)現(xiàn)對(duì)色譜柱內(nèi)溶劑和樣品的壓力和電場(chǎng)的同時(shí)驅(qū)動(dòng)。50微升小體積混合閥用以實(shí)現(xiàn)二元溶劑的梯度混合，在保證混合效率的同時(shí)，抑制了梯度的延時(shí)，保證了分析的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。定量進(jìn)樣閥為定容進(jìn)樣，用以保證進(jìn)樣的準(zhǔn)確度和精度。限流閥的作用是在分析毛細(xì)管色譜柱的出口端保持一定的壓力，從而抑制壓力驟然變化引起的氣泡的形成，保證分析系統(tǒng)的穩(wěn)定性。微流控制部分的連接管路內(nèi)徑與定量進(jìn)樣閥接口處的孔徑相同，從而在**程度上減小了進(jìn)樣死體積和柱外體積的影響。

• 納升級(jí)高精度定量進(jìn)樣閥 美國(guó)通微技術(shù)股份有限公司與V.I.C.I.聯(lián)合開(kāi)發(fā)了世界上進(jìn)樣體積*小的高精度納升級(jí)旋轉(zhuǎn)式定量進(jìn)樣閥。該閥采用內(nèi)置定量環(huán)的方式，通過(guò)刻蝕的方法實(shí)現(xiàn)納升級(jí)定量環(huán)的加工。采樣環(huán)的出口通道為100微米，并可通過(guò)PEEK接頭直接與100微米內(nèi)徑的毛細(xì)管色譜柱相聯(lián)，極大地抑制了死體積的影響。該進(jìn)樣閥的精度高，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于1％，進(jìn)樣準(zhǔn)確度好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于2％。該納升級(jí)定量進(jìn)樣閥在5000psi的壓力下仍可正常工作，無(wú)任何滲漏現(xiàn)象。

• 首創(chuàng)電動(dòng)填充毛細(xì)管色譜柱

  **實(shí)現(xiàn)電動(dòng)填充技術(shù)制備內(nèi)徑為50—320um的毛細(xì)管填充色譜柱，已經(jīng)開(kāi)發(fā)的填充柱有C18柱、C8 柱、硅膠柱、氰基柱、氨基柱、陰陽(yáng)離子交換柱、手性柱和親和柱等上百種毛細(xì)管電色譜柱，內(nèi)徑通常為50um、75um、100um，150 um，填充長(zhǎng)度可任意選擇。各種柱子的性能及應(yīng)用表明填充技術(shù)穩(wěn)定可靠、重現(xiàn)性好。

• 紫外/可見(jiàn)光檢測(cè)器和激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器 通微研制開(kāi)發(fā)了毛細(xì)管色譜儀專用的柱上檢測(cè)池，檢測(cè)池采用專門(mén)設(shè)計(jì)的光學(xué)結(jié)構(gòu)和液路結(jié)構(gòu)，保證了較高的光學(xué)利用率，同時(shí)采用柱上檢測(cè)提高了分析效率，對(duì)于整機(jī)提高靈敏度和柱效具有很好的作用。

  通微的TriSepTM-2100激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器通過(guò)其獨(dú)特的光學(xué)設(shè)計(jì)，檢出限可以達(dá)到10-13 mol/l (10-21 mol)，是世界上目前為止*靈敏的商品化的激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器。

• 高壓電源

  高精度的高壓電源采用自行設(shè)計(jì)的控制和顯示電路以及微電流測(cè)量電路。該電源輸出穩(wěn)定，精度高。輸出范圍寬，0~±30kV，完全可滿足毛細(xì)管電色譜和毛細(xì)管電泳的需要；具有輸出短路保護(hù)；低能量殘余；具有可靠的外殼屏蔽性能。

儀器標(biāo)準(zhǔn)配置 Standard Components

可選組件列表 Alternative Components