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原理
液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
經(jīng)典液相色譜的流動相是依靠重力緩慢地流過色譜柱,因此固定相的粒度不可能太小(100μm~150μm左右)。分離后的樣品是被分級收集后再進行分析的,使得經(jīng)典液相色譜不僅分離效率低、分析速度慢,而且操作也比較復雜。直到20世紀60年代.發(fā)展出粒度小于10μm的高效固定相,并使用了高壓輸液泵和自動記錄的檢測器,克服了經(jīng)典液相色譜的缺點,發(fā)展成高效液相色譜,也稱為高壓液相色譜。
應用
高效液相色譜應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
(1)分離混合物
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
通過與試樣預處理技術相配合,高效液相色譜法所達到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。
(2)生化分析
由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領域,并已成為解決生化分析問題*有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用
高效液相色譜儀與結(jié)構儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展
暫無數(shù)據(jù)!